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    產(chǎn)品名稱(chēng)：

    cDNA文庫構建
    產(chǎn)品價(jià)格：
    廠(chǎng)商性質(zhì)： 工程商 產(chǎn)品時(shí)間： 2020-11-09
    cDNA文庫是指某生物某發(fā)育時(shí)期所轉錄的全部mRNA經(jīng)反轉錄形成的cDNA片段與某種載體連接而形成的克隆的集合。標準cDNA文庫構建的基本原理是用 Oligo（dT）作逆轉錄引物，或者用隨機引物，給所合成的cDNA加上適當的連接接頭，連接到適當的載體中獲得文庫。
     文庫構建流程：

    1.       樣品Q(chēng)C

     

    2.       從總RNA中分離mRNA（原始文庫將采用至少2 µg mRNA進(jìn)行構建）

     

    3.       以帶有NotI酶切位點(diǎn)的oligo（dT）Linker Primer為反轉錄引物，再在雙鏈cDNA的5’端加SalII adaptor

     

    4.       NotI酶切、過(guò)柱去除小片段

     

    5.       將合成的雙鏈cDNA與載體進(jìn)行連接，連接產(chǎn)物轉化DH10B感受態(tài)細胞

     

    6.       cDNA文庫的QC：檢測庫容量（重組子克隆數目）；隨機挑取30個(gè)克隆子進(jìn)行PCR鑒定和雙向測序分析，檢測含插入片段的克隆子比例，檢測平均插入片段大小

     

    客戶(hù)提供

     

            注明樣品的種屬，收集樣品后，應將樣品立即置于干冰保持低溫運輸。

     

    我們提供

     

           含有文庫的甘油菌和質(zhì)量分析鑒定報告

     

    質(zhì)量保證

     

          文庫含有至少4 x 106個(gè)原始克隆

     

           樣品平均插入片斷保證大于1.0 kb

     

         有超過(guò)85%的載體含有插入片段

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