一文讀懂酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗的概念及原理

　　

　　一、基本概念

　　1、免疫：籠統地概括起來(lái)，免疫就是人和動(dòng)物機體防御、排除外來(lái)物質(zhì)(異物)進(jìn)人體內，同時(shí)識別和清除體內死亡、變性物質(zhì)和平定體內叛亂分子突變細胞，以保護和穩定自身的防護機制。

　　2、抗原：抗原是指那些能夠誘導機體的免疫系統發(fā)生免疫應答，產(chǎn)生抗體和致敏效應淋巴細胞，并在體內外與之特異性結合，發(fā)生免疫反應的物質(zhì)。

　　3、抗體：是能與相應的抗原專(zhuān)一性結合的蛋白質(zhì)分子，和機體其他生物大分子一樣是細胞的產(chǎn)物，分泌到體液中或表現在細胞表面上。

　　4、抗原、抗體反應：抗原和抗體在體外的反應亦稱(chēng)血清學(xué)反應。這類(lèi)反應可借助免疫學(xué)方法進(jìn)行檢測。

　　

　　二、酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗基本原理：

　?、倏乖蚩贵w能吸附到固相載體表面，并保持其免疫學(xué)活性；

　?、诳乖蚩贵w與某種酶連接成酶標抗原或抗體，這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性，又保留酶的活性；

　?、勖笜丝贵w與相應抗原或抗體結合后，可根據加入底物的顏色反應來(lái)判定是否有免疫反應的存在，而且顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例。

　　以雞敗血支原體（Mg）抗體檢測為例：試驗用Mg抗原包被96孔板。被檢樣品加入包被孔后的孵育階段，血清樣品中的特異性Mg抗體與包被的抗原反應形成復合物，經(jīng)過(guò)洗滌，為結合的物質(zhì)被洗掉，微孔加入酶標抗體，酶標抗體可以與吸附在包被孔內的雞抗體結合。反應后進(jìn)行洗滌，為結合的酶標抗體被洗去。加入酶底物后的顏色反應與血清中的Mg抗體的數量直接相關(guān)。