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蛋白共提取試劑盒廠(chǎng)家中了解細胞總蛋白提取的方法
發(fā)布日期:
2017-03-13
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蛋白共提取試劑盒適用于從各種原代或傳代細胞和各種實(shí)體組織,如腦、脊髓、神經(jīng)結或纖維、脂肪、肝臟、消化道、腎臟、心臟、肌肉、血管、結締組織等哺乳動(dòng)物組織中提取線(xiàn)粒體蛋白。提取過(guò)程簡(jiǎn)單方便。制備的線(xiàn)粒體蛋白不僅純度高,保持天然活性,而且絕少交叉污染。蛋白共提取試劑盒廠(chǎng)家介紹細胞總蛋白提取的方法。
1. 裂解液制備:每500ul冷的Buffer I中加進(jìn)2ul蛋白酶抑制劑混合物,混勻后置冰上備用。
2. 在4℃,1000rpm條件下離心5-10分鐘,小心吸取培養基,盡可能吸干,收集細胞。
3. 用冷PBS洗滌細胞兩次,每次洗滌后盡可能吸干上清。
4. 每5×106個(gè)細胞中加進(jìn)500ul冷的裂解液,混勻后,在4℃條件下振蕩15-20分鐘。
5. 在4℃,14000rpm條件下離心15分鐘。
6. 快速將上清吸進(jìn)另一預冷的干凈離心管,即可得到總蛋白。