細胞培養是生命科學(xué)研究中常用的實(shí)驗手段。不像其它常用的實(shí)驗方法,細胞培養是一個(gè)動(dòng)態(tài)的連續過(guò)程,細胞通常會(huì )對操作失誤或污染物有所反應,這些反應往往表現出不正常的細胞狀態(tài)或培養基外觀(guān)。如果受到支原體污染時(shí),細胞形態(tài)較之無(wú)明顯變化,極易被忽視,往往直到污染非常嚴重時(shí)才能發(fā)現。受污染的細胞膜上可能有幾百個(gè)支原體,這些支原體競爭營(yíng)養并釋放有毒的代謝產(chǎn)物,嚴重影響實(shí)驗結果。
研究表明,至少二十多種支原體能污染細胞,其中zui常見(jiàn)的有:口腔支原體(M.orale)、精氨酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)、發(fā)酵支原體(M. fermentans)、人型支原體(M. hominis)、唾液支原體(M.salivarium)、肺支原體(M.pulmonis)和梨支原體(M.pirum)等。培養細胞的支原體污染率在4%-92%不等,其污染來(lái)源包括工作環(huán)境、操作者本身(一些支原體是人體的正常菌群)、培養基、血清、細胞交叉污染、實(shí)驗器材和用來(lái)制備細胞的原始組織或器官的污染。
確認細胞培養過(guò)程中出現問(wèn)題的潛在原因是一項困難且耗時(shí)的任務(wù),在細胞培養中,任何突然的變化都應該被懷疑,同時(shí)良好的試驗規范和定期檢測支原體污染也十分必要。支原體檢測的方法有很多種,如直接培養、DNA熒光染色、ELISA和PCR法等。
支原體是一類(lèi)能夠自我復制的zui小的原核生物,可透過(guò)一般過(guò)濾膜且對抗生素有耐藥性,是原代細胞和傳代細胞的常見(jiàn)污染物,嚴重影響細胞的生長(cháng),形態(tài)和代謝。
Mycoplasma Detection Kit 支原體PCR檢測試劑盒,能夠快速、準確地檢測細胞培養中的支原體污染。試劑盒中的 Primers 是依據支原體基因組中高度保守的 16SrRNA 編碼域而設計的,只需簡(jiǎn)單的 PCR 反應就可檢測 M.Arginini, M.Fermentans, M.Hyorhinis, M.Orale, M.Salivarium, M. Hominis, M.Pneumonia 等常見(jiàn)的支原體。
全套檢測試劑
-支原體PCR檢測試劑盒中包含支原體檢測的全套試劑,方便使用
操作方法簡(jiǎn)便
-只需簡(jiǎn)單 PCR 就可以檢測常見(jiàn)的7大類(lèi)支原體
樣本容易制備
-細胞培養上清液即可作為 PCR 反應模板
結果分析直觀(guān)
-通過(guò)常規電泳就可以分析細胞是否被支原體污染
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