昆蟲(chóng)桿狀病毒技術(shù)服務(wù)是四大基因工程表達系統之一。由于其不具有任何對哺乳動(dòng)物有潛在致病性的動(dòng)物病毒片段,昆蟲(chóng)桿狀病毒表達系統問(wèn)世以來(lái),獲得了人們的高度重視。昆蟲(chóng)桿狀病毒技術(shù)服務(wù)的技術(shù)特點(diǎn):
1.由于重組病毒的分離是通過(guò)藍白斑篩選,不存在野生型和非重組型病毒污染的問(wèn)題,因此不需要傳統繁瑣的空斑分析來(lái)純化重組病毒。
2.很大程度上縮短了重組病毒構建所需要的時(shí)間且重組效率達到100%。
3.外源基因在昆蟲(chóng)細胞內能進(jìn)行正確折疊,表達出的目的蛋白結構上更接近天然蛋白,且具有完整的生物學(xué)功能。
4.昆蟲(chóng)細胞能對翻譯后蛋白進(jìn)行磷酸化、糖基化、?;?、信號肽切除及肽段的切割和分解等加工修飾。
5.桿狀病毒能容納大分子的插入片段,能包裝大的基因片段。
6.桿狀病毒表達系統具備在同一細胞內同時(shí)表達多個(gè)基因的能力,既可采用不同的重組病毒同時(shí)感染細胞,也可在同一轉移載體上同時(shí)克隆兩個(gè)外源基因,表達產(chǎn)物可加工形成具有活性的異源二聚體或多聚體。
7.昆蟲(chóng)細胞懸浮生長(cháng),容易放大培養,有利于大規模表達重組蛋白。
8.桿狀病毒對脊椎動(dòng)物無(wú)感染性,現有研究也表明其啟動(dòng)子在動(dòng)物細胞中沒(méi)有活性,因此在表達癌基因或有潛在毒性的蛋白時(shí)明顯優(yōu)于其他系統。