MicroRNA前體表達克隆真核細胞轉錄形成的非編碼單鏈小分子RNA。它們的序列高度保守,通常是21到23個(gè)核苷酸長(cháng)度,幾乎與所有的細胞功能和基因表達調控有關(guān)。它們通過(guò)靶定到mRNA3'非翻譯區(3'UTR)來(lái)調節基因的表達。MicroRNA靶標基因的表達失調與癌癥、心血管疾病等各種疾病的發(fā)生有關(guān)。 它是一類(lèi)由內源基因編碼的長(cháng)度約為22個(gè)核苷酸的非編碼單鏈RNA分子,它們在動(dòng)植物中參與轉錄后基因表達調控。microRNA的表達、抑制或過(guò)表達對于研究基因功能有重要的意義。重組腺病毒是進(jìn)行基因轉移和表達的工具,功能強大且易于操作。腺病毒*的生物學(xué)特征使它成為“載體的shou選”,被科研工作者廣泛應用。
MicroRNA前體表達克隆有以下幾點(diǎn)性能優(yōu)勢:
1、覆蓋面廣
涵蓋了miRBase最新數據庫中幾乎所有已知人、小鼠和大鼠miRNA;
2、靈活的載體選擇
慢病毒載體可轉導普通細胞和難轉染、未分化細胞;
非病毒載體可進(jìn)行穩定或瞬時(shí)轉染;
3、優(yōu)化的表達框
miRNA表達框已*測序確證并經(jīng)過(guò)優(yōu)化,有利于前體miRNA在細胞中的表達和成熟;
4、可選標記和報告基因
載體中包含的eGFP標簽可以監測轉染或轉導效率;
新霉素和嘌呤霉素標記可用于穩定細胞株的篩選。