昆蟲(chóng)桿狀病毒技術(shù)服務(wù)采用目宿銀紋夜蛾桿狀病毒(AcNPV)作為表達載體。昆蟲(chóng)桿狀病毒表達載體是一種輔助性依賴(lài),它僅有質(zhì)粒載體不能表達外源基因,還需野生型桿狀病毒輔助,形成整合有外源基因的重組型桿狀病毒才能完成外源基因的表達的真核DNA表達載體。 由于該系統所需要的周期遠比動(dòng)物或植物系統短,可以利用昆蟲(chóng)個(gè)體或其培養細胞進(jìn)行大規模的表達生產(chǎn),生產(chǎn)的重組蛋白產(chǎn)量高,蛋白翻譯后加工比細菌、酵母生產(chǎn)系統完善,而且由于昆蟲(chóng)桿狀病毒具有限制性的宿主范圍,只對特定種屬的昆蟲(chóng)及其細胞進(jìn)行感染,對人畜等脊椎動(dòng)物沒(méi)有感染能力,因此具有比在哺乳動(dòng)物及其培養細胞生產(chǎn)系統更為安全等優(yōu)點(diǎn)而成為目前*的真核表達系統之一。
昆蟲(chóng)桿狀病毒技術(shù)服務(wù)的技術(shù)特點(diǎn):
1.重組蛋白表達水平高(最高可達細胞總蛋白的50%),大多數為有生物功能的可溶性蛋白;
2.真核表達系統,重組蛋白生物學(xué)活性高,能同時(shí)表達多個(gè)外源基因;
3.可進(jìn)行翻譯后修飾:磷酸化修飾,形成正確折疊的二硫鍵,進(jìn)行N-和O-型糖基化修飾
4.表達人源化蛋白,昆蟲(chóng)細胞中糖基化途徑克服人源糖蛋白的問(wèn)題。
5.大多數昆蟲(chóng)細胞系在不加血清培養基中快速生長(cháng),得到高滴度病毒和高產(chǎn)量重組蛋白;
6.相對于其他真核表達系統成本較低,硬件設施成本低接近于原核表達,無(wú)需CO2培養箱,無(wú)需血清培養基;
7.規?;囵B簡(jiǎn)單經(jīng)濟,適合自動(dòng)化生產(chǎn),昆蟲(chóng)細胞比哺乳動(dòng)物細胞操作簡(jiǎn)單;
8.商業(yè)化的BEVS系統讓病毒重組及蛋白表達變得更簡(jiǎn)單。